Die Abenteuer der Landmaus und der Stadtmaus spielen Anfang des 20. Jahrhunderts. Emily, die praktisch veranlagte Landmaus und ihr Cousin Alexander, die weltgewandte Stadtmaus, besuchen liebenswerte Freunde und Verwandte auf der ganzen Welt, erkunden exotische Schauplätze und erleben auf ihren Reisen spannende und aufregende Abenteuer. Ein bedeutendes Ereignis steht bevor: der Panama-Kanal soll eingeweiht werden. Emily und Alexander sind extra zu ihrem Cousin Pedro nach Panama gereist, um dabei zu sein. Jedoch verzögert sich die Fertigstellung des Kanals, weil die Arbeiter Angst vor einem Seemonster haben und einfach weglaufen, wenn nacht unheimliche Geräusche zu hören sind. Außerdem treibst noch ein mysteriöser Dieb sein Unwesen. Emily und Alexander wollen der Sache auf den Grund gehen und legen sich die ganze Nacht auf die Lauer, um den Dieb auf frischer Tat zu ertappen. Der Plan funktioniert.